Zespół: 

prof. dr hab.n. med. Alicja Macke-Nauman

dr hab. n. med.  Monika Puzianowska-KuĽnicka

dr biol. Agnieszka Piekiełko-Witkowska

mgr biol. mol. Weronika Króliczak 

lek. med. Olga Turowska

mgr biol. mol.  Piotr Popławski

mgr inż.  Adam Master

mgr inż.  Małgorzata Roszkowska

mgr inż.  Jacek Połosak

mgr  Joanna Lampkowska

mgr   Anna Wójcicka

mgr   Małgorzata Wierzbicka

 

DYDAKTYKA

 

Szkolenie indywidualne




Szkolenie indywidualne w zakładzie Biochemii i Biologii Molekularnej prowadzimy z:  „Podstaw biologii molekularnej” ( Temat I), oraz z „Podstaw działania hormonów tarczycy na poziomie molekularnym (szczególnie z poznania  podstawowych  metod stosowanych w badaniach ekspresji jodotyroninowych dejodynaz w tkankach ludzkich” (Temat II).



 Temat I : Podstawy biologii molekularnej

Program:

Analiza DNA

ˇ        Podstawy teoretyczne

ˇ        Transformacja bakterii plazmidowym DNA

ˇ        Mini-hodowle płynne

ˇ        Izolacja DNA z bakterii (miniprepy)

ˇ        Mapa restrykcyjna, analiza restrykcyjna, elektroforeza

ˇ        Izolacja DNA z żelu agarozowego

ˇ        Wizualizacja wyników, interpretacja

Klonowanie

ˇ        Podstawy teoretyczne

ˇ        Restrykcja, defosforylacja wektora, fosforylacja nieufosforylowanego DNA

ˇ        Ligacja

PCR

ˇ        Podstawy teoretyczne

ˇ        Projektowanie starterów

ˇ        Zwykły PCR (namnażanie DNA z dużej ilosci czystego DNA), PCR z genomowego DNA,
  RT-PCR

ˇ        Interpretacja wyników

Analiza białek

ˇ        Podstawy teoretyczne

ˇ        Produkcja białek rekombinowanych w lizacie retikulocytów króliczych

ˇ        Izolacja białek całkowitych oraz białek jadrowych z fragmentów tkanek ludzkich

ˇ        Przygotowanie żelu poliakryloamidowego, przygotowanie prób, elektroforeza, transfer, wybarwianie czerwienia Pounceau, immunoblot, wywoływanie metoda chemiluminescencyjna

ˇ        Interpretacja wyników

Analiza RNA

ˇ        Podstawy teoretyczne

ˇ        Izolacja RNA z hodowli komórkowych i tkanek

ˇ        Żel denaturuj±cy, przygotowanie zdenaturowanego RNA, elektroforeza, transfer

ˇ        Utrwalanie blotu, hybrydyzacja z sond±, płukanie, ekspozycja

ˇ        Wywoływanie filmu i interpretacja wyników

Przygotowanie sond

ˇ        Podstawy teoretyczne, informacje na temat zasad bezpiecznej pracy z izotopami

ˇ        Sonda do blotów northern

ˇ        Sonda do testów opóznienia migracji w żelu

Testy opóĽnienie migracji w żelu (interakcja DNA z białkami)

ˇ        Podstawy teoretyczne

ˇ        Przygotowanie prób

ˇ        Żel natywny, elektroforeza, suszenie, ekspozycja

ˇ        Interpretacja wyników

Podstawy hodowli komórkowych

ˇ        Zasady utrzymania czystosci w pokoju hodowlanym

ˇ        Przygotowanie pożywek

ˇ        Pasażowanie hodowli

ˇ        Transfekcja

ˇ        Przygotowanie komórek do analizy, odczyt w luminometrze

ˇ        Interpretacja wyników

 

Szkolenie odbywa się w Zakładzie Biochemii i Biologii Molekularnej, w Centrum Medycznym Kształcenia Podyplomowego, Marymoncka 99/101, 01-813 Warszawa. Kierownik szkolenia: dr hab. Monika Puzianowska-KuĽnicka, tel 22 5693 813 (lub 810), e-mail anauman@cmkp.edu.pl 

Zakres szkolenia i jego czas sa dopasowywane do indywidualnych potrzeb szkolonego!

Istnieje mozliwo¶ć wykonania własnych doswiadczeń na własnym materiale !


Temat II:

Plan indywidualnego szkolenia w zakresie podstaw działania hormonów tarczycy na poziomie molekularnym oraz znajomosci podstawowych metod stosowanych w badaniach ekspresji jodotyroninowych dejodynaz na poziomie molekularnym

 

Program:

 Molekularny mechanizm działania hormonów tarczycy      

  ˇ Podstawy teoretyczne

  ˇ Regulacja syntezy hormonów tarczycy w gruczole tarczowym

  ˇ Regulacja wydzielania hormonów na osi podwzgórze-przysadka-tarczyca - przez hormony tarczycy

  ˇ Obwodowy metabolizm hormonów tarczycy

 

Analiza ekspresjii iodotyroninowych dejodynaz, specyficznosć tkankowa

 ˇ  Podstawy teoretyczne

 ˇ Oznaczanie aktywnosci jodotyroninowych dejodynaz metoda izotopowa ( ze znakowanym I125  substratem)

 ˇ Informacje na temat zasad bezpiecznej pracy z izotopami

 ˇ Homogenizacja tkanek, izolacja białek oraz frakcji mikrosomalnej z fragmentów tkanek  lub izolacja białek    z hodowli  komórkowej

 ˇ Oznaczanie stężenia białka metoda spektrofotometryczn±

 ˇ Oczyszczanie preparatów izotopowych na kolumnie Sephadex LH20,

 ˇ Odzielanie uwolnionego  znakowanego jodu od jodotyronin 

 ˇ Pomiar promieniowania gamma w liczniku 

 ˇ Interpretacja wyników

 

 Oznaczanie dejodynaz na poziomie białka - metoda Western Blot ( jeżeli dostępne będa przeciwciała)

ˇ  Podstawy teoretyczne

ˇ  Izolacja białek całkowitych z fragmentów tkanek ludzkich oraz z  hodowli komórkowych

ˇ  Przygotowanie żelu poliakryloamidowego, przygotowanie prób, elektroforeza, transfer, wybarwianie czerwienia Pounceau, immunoblot, wywoływanie metoda chemiluminescencyjna

ˇ   Interpretacja wyników

PCR

ˇ Podstawy teoretyczne

ˇ Projektowanie starterów

ˇ Zwykły PCR (namnażanie DNA z dużej ilosci czystego DNA), PCR z genomowego DNA, RT-PCR

ˇ  Interpretacja wyników

Analiza dejodynaz na poziomie mRNA metoda northern blot

 ˇ Podstawy teoretyczne

 ˇ Izolacja RNA z badanych tkanek  lub z hodowli komórkowych

 ˇ Pomiar stężenia RNA w roztworze metoda spektrofotometryczna

 ˇ Elektroforeza RNA na żelu agarozowym

 ˇ Przygotowanie sond do blotów northern

 ˇ Żel denaturuj±cy, przygotowanie zdenaturowanego RNA, elektroforeza, transfer

ˇ Utrwalanie blotu, hybrydyzacja z sond±, płukanie, ekspozycja

 ˇ Wywoływanie filmu, densytometria, i interpretacja wyników

Podstawy hodowli komórkowych

ˇ Zasady utrzymania czystosci w pokoju hodowlanym

ˇ Przygotowanie pożywek

ˇ Pasażowanie hodowli

ˇ Krzywa wzrostu

ˇ Otrzymywanie lizatów komórkowych

 

Szkolenie odbywa się w Zakładzie Biochemii i Biologii Molekularnej, w Centrum Medycznym Kształcenia Podyplomowego, Marymoncka 99/101, 01-813 Warszawa.

Kierownik szkolenia: Prof dr hab. Alicja Macke-Nauman, tel 22 5693 813 (lub 810), e-mail anauman@cmkp.edu.pl 

 

Zakres szkolenia i jego czas moga być dopasowywane do indywidualnych potrzeb szkolonego!

 

powrót