DYDAKTYKA

SZKOLENIA INDYWIDUALNE


Techniki molekularne w biologii i medycynie





Kurs indywidualny doskonalący
kierownik naukowy kursu prof. dr hab. Alicja Macke-Nauman

Dzień szkolenia Plan zajęc
1


1. Omówienie programu kursu - wprowadzenie. - wykład
2. Izolacja i analiza RNA (omówienie zasady izolacji) - wykład
3. Izolacja RNA.
4. Elektroforeza RNA w żelu denaturującym. Wizualizacja żelu w bromku etydyny za pomocą promieniowania ultrafioletowego.
5. Reakcja odwrotnej transkrypcji na matrycy wyizolowanego RNA.
6. Reakcja PCR na na matrycy cDNA uzyskanego w reakcji odwrotnej transkrypcji
7. Izolacja białek: omówienie zasad izolacji białek. - wykład
8. Izolacja białek.
9. Oznaczanie stężenia białka metodą spektrofotometryczną
10. Przygotowanie do elektroforezy białek SDS-PAGE: omówienie zasady rozdziału białek w polu elektrycznym, przygotowanie buforów, wylanie płytek.

2

1. Reakcja łańcuchowej polimerazy (PCR). Ustalanie warunków reakcji, projektowanie starterów, rodzaje stosowanych polimeraz DNA. Bazy danych, oprogramowanie do analizy sekwencji. Różne zastosowania reakcji PCR. - wykład
2. Techniki mikrobiologiczne. Klonowanie molekularne. - wykład
3. Elektroforeza produktów PCR w żelu agarozowym. Wizualizacja wyników za pomocą bromku etydyny i promieniowania ultrafioletowego
4. Klonowanie molekularne: Oczyszczanie produktu PCR. Synteza końcówek adeninowych. Ligacja
5. Transformacja bakterii plazmidem. Hodowla bakterii na podłożu stałym stałym.
6. Analiza restrykcyjna klonowanych konstruktów..
7. Elektroforeza białek jądrowych w żelu poliakrylamidowym w obecności SDS.
8. Transfer białek jądrowych z żelu na błonę nitrocelulozową./pokaz/
9. Hybrydyzacja błony nitrocelulozowej ze specyficznymi przeciwciałami

3

1. Hybrydyzacja błony nitrocelulozowej przeciwciałami II rzędowymi. Wizualizacja związanych przeciwciał za pomocą West Pico Chemiluminescent Reagent.
2. PCR kolonijny. Elektroforeza produktów PCR.
3. Elektroforeza produktów analizy restrykcyjnej.
4. Podstawy teoretyczne PCR czasu rzeczywistego - wykład.
5. PCR czasu rzeczywistego- pokaz.
6. 1.Hodowle komórkowe - podstawy. . - wykład
7. Pasażowanie hodowli komórkowej, przygotowanie pożywek - pokaz
8. Omówienie poznanych technik biologii molekularnej. Dyskusja

Przykładowy plan kursu - doc,rtf,pdf

Szkolenie odbywa się w Zakładzie Biochemii i Biologii Molekularnej,
w Centrum Medycznym Kształcenia Podyplomowego,
Marymoncka 99/101, 01-813 Warszawa.
Kierownik szkolenia: Prof dr hab. Alicja Macke-Nauman,
tel. 0-22 5693-813 lub 0-22 5693-810,
e-mail anauman@cmkp.edu.pl



Kurs indywidualny z biologii molekularnej

Kurs indywidualny z biologii molekularnej 1

REKRUTACJA ZAMKNIĘTA

4-741/0-00-043-2012, 09.01.2012-11.01.2012

4-741/0-00-044-2012, 28.03.2012-30.03.2012

4-741/0-00-045-2012, 05-07.11.2012

 

TEMAT

LICZBA GODZIN

Izolacja komórek jednojądrzastych z krwi pełnej

  1. Podstawy teoretyczne (omówienie metody)
  2. Część praktyczna

4

Analiza RNA

  1. Podstawy teoretyczne (zasady postępowania z RNA, omówienie alternatywnych metod izolacji)
  2. Część praktyczna

· Izolacja RNA z komórek jednojądrzastych krwi

· Przygotowanie zdenaturowanego RNA

· Elektroforeza w żelu denaturującym

· Interpretacja wyników

 

6

Odwrotna transkrypcja

  1. Podstawy teoretyczne (omówienie metody)
  2. Część praktyczna

·      Odwrotna transkrypcja z random hexamers

·      Sprawdzanie jakości cDNA: PCR na obecność mRNA genu kontrolnego, elektroforeza

·      Interpretacja wyników

 

6

Izolacja genomowego DNA z jądrzastych komórek krwi

  1. Podstawy teoretyczne (omówienie metody)
  2. Część praktyczna

 

6

PCR

  1. Podstawy teoretyczne (zwykły PCR, reverse-transcription PCR, real-time PCR, projektowanie starterów)
  2. Część praktyczna
    • Zwykły PCR (namnażanie genu z genomowego DNA)
    • Elektroforeza w żelu agarozowym
    • Interpretacja wyników

 

5

 

Razem 27 godzin. Każdy kursant wykonuje doświadczenia osobiście.

 

Organizator: Centrum Medyczne Kształcenia Podyplomowego, Zakład Geriatrii i Gerontologii, 01-826 Warszawa, ul. Kleczewska 61/63
Kierownik naukowy: prof. dr hab. n. med. Monika Puzianowska-Kuźnicka
Zgłoszenia na kurs: tel.: /22/ 56 01 160; fax: /22/ 56 01 139; e-mail: poz@cmkp.edu.pl
Płatność: Kurs bezpłatny
Przewidywana liczba punktów edukacyjnych: 27
Miejsce odbywania się zajęć: Warszawa, szpital przy ul. Banacha 1a, blok E, 2 piętro, Pracownia Naukowa Zakładu Endokrynologii (na drzwiach napis „Klinika Endokrynologii. Pracownie”)

 

Kurs indywidualny z biologii molekularnej 2

REKRUTACJA ZAMKNIĘTA

4-741/0-00-046-2012, 05.03.2012-07.03.2012

4-741/0-00-047-2012, 19.11.2012-21.11.2012

4-741/0-00-048-2012, 10.12.2012-12.12.2012

 

 

TEMAT

LICZBA GODZIN

PCR

  1. Podstawy teoretyczne (zwykły PCR, reverse-transcription PCR, real-time PCR, projektowanie starterów)

3

Badania epigenetyczne: metylacja genomowego DNA

  1. Podstawy teoretyczne (epigenetyka, omówienie metody z uwzględnieniem skutków modyfikacji chemicznej DNA)
  2. Część praktyczna
    • Modyfikacja DNA genomowego
    • Amplifikacja badanego fragmentu metodą PCR
    • Elektroforeza w żelu agarozowym
    • Interpretacja wyników

 

12

Analiza DNA

  1. Podstawy teoretyczne (omówienie rodzajów i zasad działania enzymów restrykcyjnych, zasada przygotowywania mapy restrykcyjnej, omówienie metody)
  2. Część praktyczna

·       Izolacja DNA z żelu agarozowego

·      Ligacja

·      Przygotowanie szalek LB-agarozą z Ampicyliną

·      Transformacja bakterii DNA plazmidowym

·      Mapa restrykcyjna

·      Restrykcja

·      Elektroforeza w żelu agarozowym

·      Interpretacja wyników

 

12

 

 

Razem 27 godzin. Każdy kursant wykonuje doświadczenia osobiście.

 

Organizator: Centrum Medyczne Kształcenia Podyplomowego, Zakład Geriatrii i Gerontologii, 01-826 Warszawa, ul. Kleczewska 61/63
Kierownik naukowy: prof. dr hab. n. med. Monika Puzianowska-Kuźnicka
Zgłoszenia na kurs: tel.: /22/ 56 01 160; fax: /22/ 56 01 139; e-mail: poz@cmkp.edu.pl
Płatność: Kurs bezpłatny
Przewidywana liczba punktów edukacyjnych: 27
Miejsce odbywania się zajęć: Warszawa, szpital przy ul. Banacha 1a, blok E, 2 piętro, Pracownia Naukowa Zakładu Endokrynologii (na drzwiach napis „Klinika Endokrynologii. Pracownie”)