ZASTOSOWANIE CHROMATOGRAFII WYSOKOCIŚNIENIOWEJ (HPLC) DO ROZDZIAŁU BIAŁEK
WYKŁADY
1.
Budowa i zasady działania aparatury stosowanej w HPLC.
2.
Podstawowe metody chromatograficzne stosowane w HPLC.
3.
Przedstawienie najnowszych produktów firmy Waters.
4.
Wypełnienia kolumn do HPLC.
5.
Sączenie molekularne.
6.
Chromatografia w fazie odwróconej Przedstawienie systemów detekcji stosowanych
w aparatach firmy Shimadzu.
7.
Chromatografia jonowymienna.
8.
Chromatografia powinowactwa.
ĆWICZENIA
1.
Zapoznanie się z aparatem HPLC firmy Shimadzu użytkowaną w Zakładzie
Biochemii.
2.
Przygotowanie buforów do sączenia molekularnego, przygotowanie próbki do
analizy, sączenie molekularne wzorców białek.
METODY IMMUNOENZYMATYCZNE W DIAGNOSTYCE LABORATORYJNEJ
WYKŁADY
1.
Współczesne poglądy na podstawowe zasady funkcjonowania: układu
immunologicznego, komórki B i T, delecja klonalna, mechanizmy regulujące
odpowiedź immunologiczną, biochemiczne podstawy stymulacji i proliferencji
limfocytów.
2.
Oznaczanie metodą ELISA przeciwciał antymitochondrialnych specyficznych dla
pierwotnej żółciowej marskości wątroby.
3.
Choroby autoimmunologiczne i
ich diagnostyka.
4.
Metody immunoenzymatyczne; podstawy i zastosowanie w praktyce laboratoryjnej.
5.
Celiakia glutenozależna
choroba trzewna; markery immunologiczne celiakii
6.
Oznaczanie poziomu przeciwciał antytarczycowych i ich znaczenie w diagnostyce
schorzeń tarczycy.
7.
Przeciwciała monoklonalne:
zastosowanie i metody ich otrzymywania.
8.
Interleukiny w odpowiedzi immunologicznej.
ĆWICZENIA
1.
Oznaczanie poziomu
przeciwciał tyreoglobulinowych i mikrosomalnych metodą ELISA, jako markera
schorzeń autoimmunologicznych tarczycy.
2.
Oznaczanie poziomu przeciwciał antymitochondrialnych (M2) w pierwotnej żółciowej
marskości wątroby.
3. Oznaczanie u chorych na celiakię poziomu przeciwciał przeciwko transglutaminazie.
TECHNIKI SEPARACJI BIAŁEK: ELEKTROFOREZA I "WESTERN" BLOTTING
WYKŁADY
1.
Zaznajomienie się z teorią rozdziału ektroforetycznego białek
2.
Charakterystyka białek surowiczych
2.
Technika Northern blottingu.
3.
Dobór i przygotowanie przeciwciał do oznaczeń immunoenzymatycznych po
blottingu.
4.
Identyfikacja białek monoklonalnych metodą elektroforezy i immunofiksacji.
5.
Identyfikacja oligonuklearnych białek w płynie mózgowym.
5.
Techniki elektroforezy w biologii molekularnej
ĆWICZENIA
1.
Przygotowanie żelu, rozdział elektroforetyczny białek.
2. Wykonanie blottingu i reakcji immunoenzymatycznej.
Programy wybranych kursów (cd):
DIAGNOSTYKA LABORATORYJNA SCHORZEŃ AUTOIMMUNOLOGICZNYCH
WYKŁADY
1.
Podstawy immunologii.
2.
Schorzenia autoimmunologiczne, (prawdopodobne mechanizmy prowadzące do
powstania choroby, czynniki środowiskowe i genetyczne).
3.
Metodyka oznaczania poziomu autoprzeciwciał w surowicy, ELISA, RIA.
4.
Interleukiny
w chorobach immunologicznych.
5.
Diagnostyka laboratoryjna schorzeń autoimmunologicznych wątroby
6.
Diagnostyka laboratoryjna celiakii.
7.
Metody otrzymywania przeciwciał monoklonalnych i ich znaczenie diagnostyczne.
8.
Zastosowanie immunofluorescencji pośredniej i metod immuno-enzymatycznych w
diagnostyce chorób autoimmunologicznych.
9.
Podstawy diagnostyki autoprzeciwciał.
10.
Autoprzeciwciała w kolagenozach.
11.
Choroby jelit o podłożu immunologicznym.
12.
Endokrynopatie autoimmunologiczne.
13.
Diagnostyka autoprzeciwciał w dermatologii.
14.
Gastritis chronica i Anaemia perniciosa.
15.
Glomerulonephritis.
16.
Vasculitis.
17.
Autoimmunologiczne zespoły neurologiczne.
18.
Diagnostyka różnicowa w przewlekłych aktywnych zapaleniach wątroby.
19.
Myasthenia gravis.
20. Przeciwciała
organospecyficzne.
21.
Schemat postępowanie w diagnostyce serologicznej schorzeń autoimmunologicznych.
22.
Zastosowanie
testów Westernblot i EUROASSAY w wątpliwych przypadkach diagnostycznych.
ĆWICZENIA
1. Oznaczanie
poziomu przeciwciał w chorobach tarczycy.
2.
Oznaczanie
poziomu przeciwciał anty-mitochondrialnych M2 (diagnostyka pierwotnej żółciowej
marskości wątroby).
METABOLIZM I DZIAŁANIE HORMONÓW TARCZYCY
WYKŁADY
1.
Mechanizmy kontroli
wydzielania TSH.
2.
Tyreotropina, receptor TSH i mechanizmy autoregulacyjne tarczycy
3. Mechanizmy
transdukcji sygnału hormonalnego; układ białek G.
4. Rola Na-J
symportera, tyreoglobuliny i TPO w biosyntezie hormonów tarczycy
5.
Autoantygeny tarczycy; mechanizm autoimmunizacji.
6.
Patogeneza autoimmunologicznych chorób tarczycy.
7.
Biosynteza hormonów tarczycy.
8.
Obwodowy metabolizm hormonów tarczycy.
9.
Patofizjologia obwodowego metabolizmu chorób tarczycy.
10. Mechanizm
działania hormonów tarczycy na poziomie molekularnym.
11.
Rola hormonu tarczycy w neogenezie
.
12.
Diagnostyka laboratoryjna chorób tarczycy.
DIAGNOSTYKA LABORATORYJNA CHORÓB TARCZYCY
WYKŁADY
1.
Podstawy fizjologiczne funkcjonowania gruczołu tarczowego.
2.
Współczesne poglądy na funkcjonowanie układu immunologicznego; choroby
autoimmunologiczne tarczycy.
3.
Oznaczanie poziomu tyreoglobuliny jako markera wznowy zróżnicowanych nowotworów
tarczycy.
4.
Metabolizm hormonów tarczycy.
5.
Mechanizm działania hormonów tarczycy. Udział hormonów tarczycy w neogenezie.
6.
Zespół
niskiej trijodotyroniny.
7.
Receptor
TSH, mechanizmy działania na komórkę tarczycy, znaczenie oznaczania poziomu
TSH w diagnostyce schorzeń tarczycy.
8.
Diagnostyka laboratoryjna schorzeń tarczycy.
9.
Metody immunoenzymatyczne w diagnostyce laboratoryjnej.
10.
Przeciwciała
monoklonalne.
ĆWICZENIA
1.
Oznaczanie poziomu tyreoglobuliny.
2. Oznaczanie poziomu autoprzeciwciał tyreoglobulinowych, mikrosomalnych i anty-TPO jako markerów autoimmunologicznych schorzeń.